Sa karaniwang synthesis ng DNA, RNA at hindi natural na nucleic acid, ang Deprotection at Coupling step ay gumaganap ng mga mahahalagang tungkulin.
Ang hakbang ng Deprotection ay alisin ang pangkat ng DMT sa solidong suporta o ang 5' hydroxyl group sa nakaraang nucleoside na may organic acid, at ilantad ang hydroxyl group para sa susunod na hakbang ng pagsasama.Ang 3% trichloroacetic acid sa dichloromethane o toluene ay kadalasang ginagamit upang isagawa ang hakbang ng deprotection.Ang konsentrasyon ng trichloroacetic acid at ang deprotection time (deblocking time) ay nangingibabaw sa kadalisayan ng mga huling produkto.Ang mababang konsentrasyon at hindi sapat na oras ng pag-deblock ay nag-iiwan ng walang reaksyong pangkat ng DMT, na nagpapababa sa ani at nagpapataas ng hindi gustong mga dumi.Ang mahabang oras ng pag-deblock ay maaaring humantong sa depurine ng mga synthesized na pagkakasunud-sunod, na bumubuo ng mga hindi inaasahang impurities.
Ang hakbang ng Coupling ay sensitibo sa nilalaman ng tubig ng mga solvents at ang kahalumigmigan sa hangin.Ang konsentrasyon ng tubig sa synthesis ay dapat na mas mababa sa 40 ppm, mas mahusay na mas mababa sa 25 ppm.Upang mapanatili ang kondisyon ng anhydrous synthesis, ang synthesis ng nucleic acid ay dapat isagawa sa isang mababang kahalumigmigan na kapaligiran, kaya inirerekomenda namin ang aming customer na gamitin angAmidites Dissolved Equipment, na maaaring matunaw ang may pulbos o mamantika na Phosphoramidite sa anhydrous acetonitrile upang maiwasan ang pagkakadikit sa hangin.
Dahil ang pagkatunaw ng mga phosphoramidites ay mas mahusay sa sitwasyong hindi tubig, at mga molecular traps upang i-adsorb ang trace water sa mga reagents at amidite, kailangan itong ihanda angMolecular Traps.Inirerekomenda namin ang 2 g subsieve para sa 50-250ml na reagent na bote, 5g para sa 250-500ml na reagent na bote, 10g para sa 500-1000ml na reagent na bote, at 20g para sa 1000-2000ml na reagent na bote.
Ang pagtunaw ng mga phosphoramidites ay dapat isagawa sa ilalim ng hindi gumagalaw na kapaligiran, at ang pagpapalit ng mga activator reagents at acetonitrile ay dapat matapos sa oras.Ang Capping at Oxidation reagents ay dapat gamitin sa lalong madaling panahon, ang mga bukas na reagents ay nagbibigay ng mas kaunting buhay ng istante, at mas kaunting aktibidad sa panahon ng synthesis.
Oras ng post: Ago-09-2022